• 照射剂量和时间：不同种类的微生物对紫外线的敏感性不同，用紫外线消毒时必须使用照射剂量达到杀灭目标微生物所需的照射剂量。杀灭一般细菌繁殖体时，应使照射剂量达到10000ｕW.s／c㎡；杀灭细菌芽胞时应达到100000ｕW.s／c㎡ ；病毒对紫外线的抵抗力介于细菌繁殖体和芽胞之间；真菌抱子的抵抗力比细菌芽胞更强，有时需要照射到以对600000ｕW.s／c㎡ ；在消毒的目标微生物不详时，照射剂量不应低于100000ｕW.s／c㎡ 。辐照剂量是所用紫外线灯在照射物品表面处的辐照强度和照射时间的乘积。因此，根据紫外线光源的辐照强度，可以计算出需要照射的时间。例如，用辐照强度为70 uW／c㎡的紫外线表面消毒器近距离照射物品表面；选择的辐照剂量是100000ｕW.s／c㎡；则需照射的时间是：100000ｕW.s／c㎡ ÷70ｕW／c㎡ ＝24分钟。二氧化碳培养箱

②90℃高温湿热灭菌

• 湿热灭菌是利用热蒸汽灭菌。原因是：

①热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强。水分子的存在有助于破坏维持蛋白质三维结构的氢键和其他相互作用弱键，更易使蛋白质变性。蛋白质含水量与其凝固温度成反比；

②热蒸汽比热空气穿透力强，能更加有效地杀灭微生物：

③蒸汽存在潜热．当气体转变为液体时可放出大量热量，故可迅速提高灭菌物体的温度。

多数细菌和真菌的营养细胞在60℃左右处理15min后即可杀死，酵母菌和真菌的胞子要耐热些，要用80℃以上的温度处理才能杀死，而细菌的芽胞更耐热，一般要在120℃下处理15min才能杀死。湿热灭菌常用的方法有常压蒸汽灭菌和高压蒸汽灭菌。

蛋白质含水量与其凝固温度的关系

蛋白质含水量% 蛋白质凝固点℃

50 56

25 74~80

18 80~90

6 145二氧化碳培养箱

• ③高温干热灭菌是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿热气体穿透的油脂（如油性软膏机制、注射用油等）和耐高温的粉末化学药品的灭菌，不适合橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。

在干热状态下，由于热穿透力较差，微生物的耐热性较强，必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。因此，干热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。为了保证灭菌效果，干热灭菌条件一般为（160〜170℃） ×120min以上、 (170〜180℃）×60min以上或250℃×45min以上，也可采用其他温度和时间参数。

细菌的繁殖体在干燥状态下， 80℃～100℃ 1小时可被杀死； 芽胞需要加热至160℃～170℃ 2小时才杀灭，可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。适用于耐高温的玻璃器皿、瓷器、玻质注射器等；